Aktivitas antibakteri Zinc Bacitracin adalah menghambat sintesis mukopeptida dengan blokade reaksi nonspesifik katalisis fosforylase. Zinc bacitracin memiliki efektivitas bakterisidal melawan bakteri Gram positif. Resistensi bakteri yang sensitif terhadap zat ini kurang. Aktivitas antibakterinya sangat spesifik, sehingga tidak memiliki resistensi silang dengan antibakteri lainnya.
Berperan sebagai antibakteri untuk mengobati infeksi bakteri Gram positif, seperti Staphylococcus, Streptococcus, Enterococcus, Clostridium perfringens, dan Corynebacterium, serta efektif melawan Actinomyces dan Spirochaeta.
